方法ⅲ
- ①CBMCs上のC5aレセプター（CD88）発現は、FACSを用いて評価した。
- ②CBMCsの遊走と脱顆粒は、EZ-TAXIScanを用いて評価した。
RA 30例、OA 21例のまとめ
RAとOAの滑膜内のmast cellのcounts/㎟
RA滑膜にはOAと比し有意に多数のマスト細胞が存在した
RA滑膜組織にて、ﾏｽﾄ細胞は豊富なtryptaseを含有する
CBMCsは、細胞表面にc-kit(CD117)を発現し、細胞内にtryptaseを貯留している
RA滑膜線維芽細胞との共培養によるマスト細胞C5aR(CD88)の誘導
ﾏｽﾄ細胞単独培養ではC5aRを発現していなかった。
→RASFとの共培養にてCBMCsにC5aRが誘導された。
各種刺激によるＣ５ａＲの誘導（FACS）
他刺激に比べ、RASFとの共培養は強力にC5aRを誘導する
C5aによるマスト細胞の遊走
マスト細胞は、C5aの濃度依存性に遊走した
W-54011によるマスト細胞遊走制御
W-54011は濃度依存性にマスト細胞の遊走を阻害し、W-54011 10nMでコントロールと同等まで完全に抑制された
C5aによるマスト細胞の脱顆粒
マスト細胞は、C5aの濃度依存性に脱顆粒した
W-54011によるマスト細胞脱顆粒制御
W-54011は濃度依存性にマスト細胞の脱顆粒を阻害し、W-54011 100nMでほぼ完全に抑制した